讲到尿素，大家应该都了解，有人问土壤中分解尿素的细菌的分离与计数，还有人问土壤中分解尿素的细菌的分离与计数，这到底怎么回事呢？其实土壤中分解尿素的细菌的分离与计数呢，下面是小编推荐给大家的土壤中分解尿素的细菌的分离与计数，希望大家有所收获。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
不知你的目的是什么？ 如果是从土壤中分离分解尿素的细菌，那就以尿素为唯一的碳源和氮源配制培养基，补充部分无机盐和活性物质（如维生素等，手册里有，注意不要因为补充活性物质而增加碳源和氮源）。将土壤样品稀释并按不同的浓度梯度和降温但还未凝固的培养基混合均匀，在培养箱中培养。
至于活菌计数的原理和方法，简单介绍一下；
将细菌染色后在显微镜下观察到并计数的细菌有活的也也可能有死的， 而在培养皿上看到的菌落只要你将样品浓度稀释到足够低，一般按一个菌落就是一个细菌计数，而且都是活菌。
希望对你有帮助。
对比教材《生物技术实践》：
当检验是否有杂菌污染时，应将接种后的培养基与一个未接种的培养基（所含物质相同）都放入适宜温度的恒温箱中，培养一段时间后，分别观察并记录结果。如果未接种的培养基出现了菌落则存在杂菌污染；反之，则不存在。（参见课本P20上方）
在对培养基的选择作用进行检验时（这里就选择培养可分解尿素的细菌为例），应在以尿素为唯一氮源的培养基中培养经过选择培养基选择的菌种，并加入酚红指示剂，如果指示剂变红，则说明PH升高，尿素在脲酶的作用下分解产生NH3，即选择培养基能起到选择作用；反之，则不能。（参见课本P26图2-10与课题延伸第三段）
所以检验杂菌污染与检验选择培养基的选择作用时使用的培养基是不一样的
土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据图回答相关
（1）能分解尿素的细菌将尿素氧化成氨气，代谢类型为异氧需氧型．
（2）尿素为唯一碳源的培养基上，只有能分解尿素的菌才能以尿素作为氮源生长繁殖，不能分解尿素的菌因缺乏氮源无法生长繁殖，因此分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用尿素为唯一碳源的培养基进行分离，分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气，使酚红指示剂显红色，所以要加入酚红指示剂进行鉴别．
（3）若取土样5g，应加入45ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液，样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目，选用一定稀释范围的样品进行培养，取样稀释前，一定要将菌液摇匀以减少误差；将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上．
（4）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落既是分解尿素的菌的菌落，估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30 到300之间的平板，分析表格是数据可知，105和106的稀释度平板菌落数在这一范围．
故答案应为：
（1）异氧需氧型
（2）尿素为唯一氮源 酚红
（3）45
（4）摇均（震荡、混匀） 涂布器（玻璃刮刀） 稀释涂布（平板）法
（5）红色环带 105或106
高中生物选修1 专题二课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
实验题目：牛奶细菌离与计数
实验目：离牛奶菌,并进行计数.
实验材料：培养皿,接种环,琼脂1.2%、氯化钠0.5%、酵母粉0.5% 蛋白胨1% 菌操作台,酒精灯、酒精棉、化培养箱
实验：涂布
实验步骤：牛奶液体稀释10－4~10－10,根据牛奶菌少定,做几,进行涂平板.离单菌落,计数,根据所要菌落数计,进行相关计算即.
实验结：记录数据及现象
下列是关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，其中错误的是（ ）A．利用稀释涂布
A、利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度，稀释倍数太低，菌落太多会长在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，都不易进行计数，A正确；
B、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置未接种的没有选择作用的细菌通用的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，B正确；
C、将实验组和对照组平板倒置，30～37℃恒温培养24-48小时，C错误；
D、计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数，D正确．
故选：C．
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验报告。要详细的报告包括原理、步骤、表格等一系列。急求！！！
百度文库中有相关内容，题目为“土壤中分解尿素尿素的细菌的分离与计数”，可以自己查阅
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的培养基上有固氮微生物吗
有可能有。因为培养基中无氮源，能生长的除了能利用尿素的细菌外，固氮菌也能利用空气中的氮而生长。
下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验．实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较
（1）倒平板应在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染．
（3）按照由101～108倍稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布3个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布1个平板做对照．
（5）当菌落数目稳定时，选取茵落数在30-300的平板进行计数．如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是（稀释度是105倍）5×107，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数多于无氮培养基上的数目，原因是无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存．
故答案为：（1）火焰旁
（3）3 1
（5）30～300 5×107 多于 无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存
土壤微生物的分离与计数
用于一些特殊功能菌的计数，如，硝化细菌和反硝化细菌。
假设被测定的微生物在稀释液中均匀分布，并在试管中全部存活，随着稀释倍数的加大，稀释液中微生物的数量将越来越少，直到将某一稀释度的土壤稀释液接种到培养基上培养后，没有或很少出现微生物，根据没有出现细菌的最低稀释度和出现菌落的最高稀释度计算土壤中微生物的数量。
分离土壤中的细菌为什么要稀释
显微镜直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方
法。
直接计数法中常用的是显微镜直接计数法，这种方法是先将待
测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数(图1-
3-1)。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微
生物总数。直接计数法所需设备简单，可迅速得到结果，而且在计数
的同时能观察到所研究微生物的形态特征，其缺点是难以计数微小的
细菌。这种方法一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
间接计数法最常用的是稀释平板计
数法，它是根据微生物的培养特征而设计
的计数方法。这种方法在样品中含菌数较
少的情形下，也可以完成计数。
应用稀释平板计数法计数时，需要
将待测样品配制成均匀的系列稀释液，尽
量使样品中的微生物细胞分散开。再取一
定稀释度、一定量的稀释液接种到平板
中，使其均匀分布于平板中的培养基内；
或是将一定量的稀释液，与溶化后冷却至
45℃左右的琼脂培养基混合，倾入无菌培
养皿中，摇匀、静置待凝。经过培养后，
就由单个微生物生长繁殖形成菌落，这样
的一个菌落就代表着一个微生物个体。统
计培养基中出现的菌落数，即可推算出检
测样品中的活菌数。
FOR EXAMPLE:]
土壤中好气性细菌的计数
土壤中生活的微生物种类和数量是极其丰富的，这些数量众多的
微生物对提高土壤肥力有重要作用。因此，测定土壤中的含菌量可以
作为判定土壤肥力的一个重要指标。
材料器具
土壤样品；牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(附录二)、无菌水；培养皿、
移液管、天平、锥形瓶、试管、酒精灯、恒温培养箱、摇床等。
活动程序
1.制备土壤稀释液
取土壤表层5～10 cm 处的土样。准确称取1 g 土样，放入盛有
99 mL 无菌水的锥形瓶(250 mL，放有小玻璃珠)中，用手或摇床振荡
20 min，即制成102 倍的稀释液。
用1 mL无菌移液管，吸取10 2倍稀释液0.5 mL，移入装有4.5 mL
无菌水的试管中，配制成103 倍稀释液。
用同样的方法可制成稀释倍数为104、105、106 的系列稀释菌液
(图1-3-2)。
图
移液时，要将移液管插入液面，吹吸3 次，每次吸上的液面要高
于前一次，让菌液混合均匀并减少稀释中的误差。每配一个稀释度要
换用一支移液管。
2.取样及倒平板
将无菌培养皿编号，依次为104、105、106，每一号码设置三个
重复。
用无菌移液管三支，分别吸取稀释倍数为104、105、106的土壤稀释
液各0.2 mL，注入到相应编号的培养皿中(每个稀释倍数各三个培养皿)。
将已灭菌牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化，待冷却至45～50 ℃左
右，倾入到无菌培养皿中，每皿约15 mL，轻轻转动培养皿，使土壤
稀释液与培养基混合均匀。
3.培养
将上述接种好的平板培养基冷却后，倒置放入28～30 ℃的恒温
培养箱中培养24～36 h，直至长出菌落为止。
4. 观察记录
将实验中得到的菌落数填入表1-3-1。
结果分析
1.选取具有合适菌落数的稀释倍数并计数。
在计算结果时，从接种的3 个稀释度中选择一个合适稀释倍数，
统计出菌落数(图1-3-3)。选择的原则是：
过
(1) 细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有30～300 个菌落为
宜。霉菌以每个培养皿内有10～100 个菌落为宜。
(2) 同一稀释倍数各个重复的菌落数相差不太悬殊。
2.将统计出的菌落数按下列公式计算，得出每克样品菌数。
每克土壤样品菌数= 某稀释倍数的菌落平均数×稀释倍数
